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Cellutron北京試劑
產(chǎn)品時間:2022-08-29
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產(chǎn)量較高的新生兒心肌細胞分離

貓?zhí)枺?span>nc-6031

科學家的正確策略

大多數(shù)關于新生大鼠或小鼠肌細胞分離的方法不僅是耗時耗力的過程,而且會產(chǎn)生研究人員最關心的低細胞活力。

需要更多細胞來研究細胞生長、分化和死亡的細胞和分子機制的科學家會發(fā)現(xiàn),他們的實驗不可能獲得低產(chǎn)量的細胞。

高性能系統(tǒng)

使用最新更新的心肌細胞分離系統(tǒng),您將*消除所有這些問題,并在一小時內獲得最健康和最大產(chǎn)量的新生兒心肌細胞。

新生大鼠或小鼠心肌細胞分離系統(tǒng)無風險,保證滿意。

隔離步驟

  產(chǎn)品

  貓 #    尺寸     價格

  Neomyt 試劑盒   nc-6031      6      415 美元

  SureCoat(用于培養(yǎng)板涂層)   SC-9035      500 毫升  

  115 美元

  NS培養(yǎng)基(含血清)       m-8031       500 毫升  

  175 美元

  NW 培養(yǎng)基(不含血清)

  m-8032       500 毫升     124 美元

  * 1 rxn 可以做 5 - 35 顆新生大鼠心臟,20 - 80 顆小鼠心臟

  * Neomyt 試劑盒中不包含 NS 培養(yǎng)基和 NW 培養(yǎng)基

非病毒哺乳動物表達系統(tǒng)

轉基因表達系統(tǒng)

 

非病毒轉基因

表達系統(tǒng)

誘導表達

向量系統(tǒng)

miRNA表達載體

基于 miRNA

基因敲除

小環(huán) miRNA

表達載體

通過訂購我們的產(chǎn)品,您已閱讀并同意我們的 條款和條件

miRNA 表達載體

Cellutron 為您提供強大的 miRNA 工具來檢查 miRNA 對細胞功能和表型的影響。有數(shù)百種庫存載體可用于您選擇的天然 miRNA antagomiR 過表達。此外,Cellutron 還構建了用于表達人工 miRNA 的表達載體,這些人工 miRNA 被設計成與您的目標基因具有 100% 的同源性,從而阻斷基因表達。

Cellutron miRNA expression vectos 允許您:

1. 表達人工 miRNA 以敲低靶基因的表達。

2. 高效轉染多種細胞類型,包括:分裂細胞、非分裂細胞、成體和胚胎干細胞以及iPS細胞。

3. 在體內和體外有條件地表達您選擇的 miRNA

4. 生成用于長期 miRNA 表達的穩(wěn)定細胞系。

一般 miRNA 通路

 

MicroRNAs (miRNAs) 是長度為 21 25 個核苷酸的小型非編碼 RNA,它們通過與 3' 非翻譯區(qū)以及可能與靶 mRNA 的編碼序列進行堿基配對來調節(jié)基因表達,從而導致翻譯抑制或降解。

 

miRNA RNA 聚合酶 II 轉錄,可以來源于單個 miRNA 基因、蛋白質編碼基因的內含子或通常編碼多個密切相關的 miRNA 的多順反子轉錄物。Pri-miRNAs 通常有幾千個堿基長,在細胞核中被 RNase Drosha 加工成 70-100 個核苷酸長的發(fā)夾狀前體,稱為 pre-miRNAs。在轉運到細胞質后,pre-miRNA RNA 核酸內切酶 Dicer 進一步加工以產(chǎn)生雙鏈 miRNA。

 

然后將此 miRNA 雙鏈體整合到稱為 RNA 誘導的沉默復合物 (RISC) 的多組分蛋白質復合物中。在此過程中,miRNA雙鏈體的一條鏈被選擇為成熟的miRNA,而另一條鏈通常被快速去除和降解。miRNA 5' 末端的核苷酸 2-8 被命名為種子序列",因為該區(qū)域似乎對 mRNA 靶標識別特別重要。

 

miRNA在真核生物中非常保守,在基因表達和調控中發(fā)揮著至關重要的作用。

 

誘導表達載體系統(tǒng)

 

Cellutron 利用 Cre-Loxp 技術開發(fā)了一種新型可誘導表達系統(tǒng),并提供了調節(jié)轉基因表達的能力。該系統(tǒng)包含兩個具有強 CAG 啟動子的表達載體,用于高效基因表達。pEGFP/RFP-miRNA-BL pEGFP/RFP-T2A-GOI-BL 是具有 EGFP 3X 終止序列的表達載體,其兩側有兩個 loxP 位點,然后是用于表達 RFP miRNA 或蛋白質編碼轉基因的共順反子序列. 此外,在 miRNA 和蛋白質編碼轉基因的表達盒下游克隆了一個殺稻瘟素 (BL) 表達盒(用于哺乳動物細胞中的藥物選擇)。與誘導型表達載體共轉染需要 pCreER-IRES-Puro。

 

共轉染后,系統(tǒng)最初只表達 EGFP,這是一種方便監(jiān)測轉染效率的報告蛋白??梢栽隗w外和體內添加 4-OHT 以激活 Cre 重組酶的條件活性形式,從而導致 miRNA 或蛋白質編碼轉基因的高水平和受調控的表達。

 

 

 

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