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BIO-rad BIO-rad 北京代理
產(chǎn)品時間:2020-03-16
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BIO-rad代理 北京華新康信生物科技有限公司

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產(chǎn)品列表:

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1653304 CASTING FRAME,M-P3    bio-rad

1653311 OUT Glass PLT W/1mm  SP,5, M-P3 bio-rad

1653308 INNER GLASS PLATE,5,M-P3      bio-rad

1863009 DG8 gaskets for ddPCR, includes 1 package of 24 gaskets     bio-rad

165-2089      0.1cm間距電擊杯 bio-rad

1652088 電擊杯    BIO-RAD

12007283      Bio-Plex Pro  Human Cytokine Screening Panel     Bio-rad

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 北京華新康信生物科技有限公司專注于生命科學領域,由豐富從業(yè)經(jīng)驗的技術團隊和管理團隊組建而成,主營生物化學試劑,儀器,實驗耗材等。

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趨化因子( chemokines) 是一類對血細胞遷移和聚集有調(diào)節(jié)作用的小分子多肽, 趨化因子及其受體在腫瘤生長、轉(zhuǎn)移和免疫逃逸以及自身免疫疾病中中發(fā)揮重要作用。作為炎性微環(huán)境中的主要組分,趨化因子在調(diào)節(jié)腫瘤/免疫細胞和正常組織細胞的平衡中起重要作用。對于不同腫瘤生長、侵襲、轉(zhuǎn)移及免疫調(diào)節(jié)相關的趨化因子及其受體的研究也日益增多。選擇一款給力的多因子篩選工具,幫助您迅速出腫瘤免疫相關趨化因子調(diào)控網(wǎng)絡。

僅需 10-12.5 ul 樣本即可完成 30-40 種不同趨化因子的篩選

2-3 小時即可完成篩選實驗

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DNA 甲基化研究,進來了解一下~

DNA 甲基化(DNA methylation)是 DNA 修飾途徑之一,即在甲基轉(zhuǎn)移酶的催化下,DNA 的 CpG 兩個核苷酸的胞嘧啶被選擇性地添加甲基,形成 5-甲基胞嘧啶(5-mC)。目前有大量研究證實,DNA 甲基化異常往往會引起染色質(zhì)結構、DNA 穩(wěn)定性等發(fā)生改變,抑制相關基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控導致疾病發(fā)生,如腫瘤、血管類疾病、神經(jīng)紊亂等。DNA 甲基化狀態(tài)亦可作為疾病診斷、監(jiān)測及預后的重要 Biomarker1,4,5,6。

小編粗略盤點了一下目前常用的幾種 DNA CpG 甲基化檢測方法,下面進入掃盲時刻:

亞硫酸氫鹽處理+測序(BSP):經(jīng)過亞硫酸氫鹽處理后,未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變;通過 PCR 擴增目的片段,并對產(chǎn)物進行測序,將序列與未經(jīng)處理的序列進行比較,判斷 CpG 位點是否發(fā)生甲基化。

甲基化特異性 PCR(MS-PCR):在亞硫酸氫鹽處理后,使用分別針對甲基化和非甲基化的序列設計的引物開展 MS-PCR,用電泳檢測 MSP 擴增產(chǎn)物。若針對甲基化序列設計的引物能擴增出片段,則說明該檢測位點存在甲基化;反之則則說明該檢測位點不存在甲基化。

甲基化敏感性限制性內(nèi)切酶法(MSRE):基于甲基化敏感 Ⅱ 型限制性內(nèi)切酶不能切割含有一個或多個甲基化切點序列的基本原理,酶切產(chǎn)物經(jīng)電泳分離,探針雜交,掃描定量后得出原樣本中甲基化的比例。

甲基化敏感性高分辨率熔解曲線法(MS-HRM):經(jīng)亞硫酸氫鹽處理后,甲基化與未甲基化 DNA 存在序列差異,可通過熔解溫度及峰型的變化區(qū)分*甲基化、*非甲基化或雜合甲基化。

焦磷酸測序(Pyrosequencing):基于引物延伸的焦磷酸測序技術,通過將鏈合成過程中釋放出的焦磷酸(PPi)轉(zhuǎn)化成光信號, 轉(zhuǎn)換成一個峰值,其高度與核苷酸數(shù)目成正比。經(jīng)重亞硫酸鹽處理的序列可看作是 C>T SNP 位點。因此可憑借信號峰值高低來確定甲基化狀態(tài)。

熒光定量法(Methylight):利用亞硫酸氫鹽處理 DNA 樣本,設計分別針對待測序列甲基化和非甲基化狀態(tài)的 Taqman 探針和引物進行熒光 PCR 擴增,以區(qū)分 CpG 甲基化和非甲基化狀態(tài)。

上述幾種方法各有優(yōu)缺點,比如 BSP,結果可靠,度高,但需要大量的克隆,操作過程繁瑣;MSRE,需要找到合適的酶切位點,受轉(zhuǎn)化不*影響;MS-HRM,對儀器要求高,需要有 HRM 模塊的熒光定量 PCR 儀(Bio-Rad 定量儀器均有此功能);Pyrosequencing,過程復雜。

除此之外,還有高通量檢測技術,如質(zhì)譜、靶向測序、illumina450k、850k 芯片、Pacific Bioscience 的 SMRT 測序、Oxford Nanopore 測序等。

QX200 微滴式數(shù)字 PCR(ddPCR)技術以分子計數(shù)的方式實現(xiàn)對靶標核酸序列的定量而不依賴標準曲線,且檢測的靈敏度、重復性和準確性有很大提高。ddPCR 技術在癌癥分子標志物發(fā)現(xiàn)、病毒載量分析、傳染病研究、基因組結構變異及 NGS 文庫定量等方面得到廣泛應用。

 而在 DNA甲基化研究方面 ddPCR 靈敏度更高,能在高豐度非甲基化背景下檢測出甲基化序列,耐受前期處理帶來的 PCR 抑制物的干擾,提高靈敏度,而且還能準確定量。

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